|
| Material y
Soluciones
| - 1 Jeringa desechable de 10ml (nueva)
- 1 Jeringa desechable de 3ml (nueva)
- 1 Cartucho Sep-Pak C18
- 3 Tubos eppendorff de 1.5ml
- 5 ml de Acetonitrilo
- 10 ml de Agua mQ estéril
- 3 ml de una solución Acetonitrilo:Agua 50:50 v/v
(Solución A)
|
| Procedimiento
| - Lavar el Sep-Pak con 5ml de acetonitrilo
- Lavar el Sep-Pak con 5ml de agua
- Pasar lentamente el oligo disuelto en 1.5ml de agua y colectar
el efluente
- Pasar dos veces mas el efluente colectado en el paso anterior
- Lavar con 3ml de agua y desechar el efluente
- Eluir con 3ml de la solución A colectando en los 3
tubos eppendorff (1 ml en c/u). El oligo se eluirá mayormente en el
primer tubo
- Secar en Savant, resuspender en agua mQ y medir absorbancia a
260nm
|
| NOTAS
|
- Los lavados y eluciones deben hacerse lentamente
(2 gotas/seg) evitando la formación de burbujas en el Sep-Pak
- La jeringa debe acoplarse horizontalmente por el lado mas
largo del Sep-Pak y manipularse en forma vertical
- Utilizar un Sep-Pak por cada oligo
|